• Рейтинг:
  • Доступно:
    Есть в наличии
1 200.00грн.
Есть в наличии

Универсальный набор для выделения и очистки нуклеиновых кислот (ДНК, РНК) "Агросорб НК"

Вашему вниманию набор растворов для выделения ДНК и РНК из биологических проб растительного и животного происхождения. Препараты нуклеиновых кислот, подготовленные с помощью данного набора. Подойдет для дальнейшего проведения обратной траскрипции, классической полимеразной цепной реакции, ПЦР в реальном времени, а также для других типов амплификации. Имеет широкое применение: от гербарного материала, пищевых продуктов, растительных проб до крови и сыворотки.

Набор растворов "Агросорб НК" аппробирован нами и нашими коллегами и очень хорошо себя зарекомендовал.

Украинский производитель. Доставка по Харькову (возможен самовывоз) и по Украине почтой.

Инструкция по выделению НК (ДНК, РНК) из биологического материала (Агросорб НК)

Содержание

1. Цель

 

2. Принцип метода

 

3. Оборудование, материалы, реактивы

 

4. Приготовления и хранения растворов

 

5. Процедура выполнения анализа

 

6. Техника безопасности

 

7. Необходимая документация

 

1. Цель - выделить ДНК из разного биологического материала (семян и вегетативных органов растений, микроорганизмов, образцов животного происхождения и т.д.).

2. Принцип метода - при выделении ДНК используется лизуючий реагент с гуанидинхлоридом для солюбилизации клеточного дебриса, денатурации клеточных нуклеаз. В присутствии лизирующего реагента ДНК сорбируется на силики-сорбенте, отмывается от белков и солей спиртовым раствором.

3. Оборудование, материалы, реактивы
3.1. Оборудование

  • штатив для микропробирок;
  • микропробирки (1,5 мл)
  • дозаторы автоматические (от 10 до 1000 мкл);
  • одноразовые наконечники для дозаторов;
  • термостат для микропробирок;
  • центрифуга высокоскоростная для микропробирок;
  • вортекс;
  • пинцет;
  • шпатель;
  • индивидуальные средства защиты персонала;
  • ёмкость с дезинфицирующим раствором.

3.2. Реактивы

  • тест-набор «Агросорб НК».

4. Приготовления и хранения растворов

Тест-набор сохраняется в течение 1 года при температуре 4 ° С.

5. Процедура выполнения анализа

5.1. Подготовить пробы к анализу (если требуется предварительная пробоподготовка). Достать набор реактивов из холодильника, прогреть до комнатной температуры.

5.2. В пробирку 1,5 мл внести 100 мкл пробы, добавить 400 мкл лизирующего раствора, тщательно перемешать.

5.3. Перенести в термостат на 5-7 мин. при температуре 65 ° С. Если выделение проводится с твердого сухого материала - термостатуваты 30-40 мин.

5.4. Центрифугировать 30 сек. при 5 тыс. об. / мин. Супернатант перенести в новую пробирку (примерно 200 мкл).

5.5. Перемешать Сорбент на вортексе.

5.6. Добавить 20 мкл сорбента в каждую пробирку.

5.7. Пробирки перенести на вортекс и перемешивать 10 мин. (7-10 об. / Мин.).

5.8. Центрифугировать 30 сек. при 5 тыс. об. / мин.

5.9. Осторожно удалить супернатант. К осадку добавить 200 мкл лизирующего раствора, тщательно перемешать на вортексе до полного гомогенного состояния.

5.10. Добавить в пробирку 1 мл солевого буфера. Перемешать перелистыванием 5-10 раз.

5.11. Центрифугировать 30 сек. при 5 тыс. об. / мин. Осторожно слить супернатант.

5.12. Добавить в пробирку 1 мл солевого буфера, перемешать на вортексе, центрифугировать 30 сек. при 5 тыс. об. / мин., слить супернатант.

5.13. Повторить пункт 5.12.

5.14. Подсушить осадок на термостате 4-5 мин. при температуре 65 ° С. Крышки пробирок при этом должны быть открытыми.

5.15. Добавить 50-100 мкл Растворителя НК. Перемешать на вортексе до получения гомогенной суспензии.

5.16. Перенести в термостат на 4-5 мин. при температуре 65 ° С.

5.17. Еще раз перемешать содержимое пробирки на вортексе. Центрифугировать 1 мин. при 14 тыс. об. / мин.

5.18. Перенести супернатант с ДНК в чистую пробирку. Хранить при 4 ° С в течение месяца.

5.19. Для длительного хранения перенести в холодильник при минус 20 ° С в течение года.

6. Техника безопасности

6.1. При работе с тест-набором обязательно использовать средства индивидуальной защиты (одежда, обувь, перчатки), поскольку в состав лизуючий раствор входит сильный денатурированной агент гуанидинхлорид.

6.2. Для предупреждения контаминации следует менять наконечники при внесении другого реактива.

7. Необходимая документация

  • инструкция по использованию термостата для микропробирок;
  • инструкция по использованию центрифуги скоростной для микропробирок;
  • инструкция к Вортекс для микропробирок;
  • инструкция по охране труда ООО «Агроген НОВО»;
  • инструкция по пожарной безопасности ООО «Агроген НОВО».